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豬轉鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒
豬轉鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒
更新時間:2017-07-10
型    號:F05340
所屬分類:其它ELISA試劑盒
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豬轉鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒服務于高校及免疫學科研單位,*,售后服務完整.有任何試劑盒方面的問題都能幫您解決,免除您的后顧之憂。需要產品說明書及其它詳細信息請直接與我們。

豬轉鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒產品概述:

豬轉鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒

目的:本試劑盒用于測定豬血清,血漿及相關液體樣本中轉鐵蛋白受體(TFR)的含量。
實驗原理:
    本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬轉鐵蛋白受體(TFR)水平。用純化的豬轉鐵蛋白受體(TFR)抗體包被微孔板,往微孔中依次加入轉鐵蛋白受體(TFR),再與HRP標記的轉鐵蛋白受體(TFR)抗體結合,形成免疫復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉鐵蛋白受體(TFR)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中豬轉鐵蛋白受體(TFR)濃度。
操作步驟
1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為90nmol/L,60nmol/L ,30nmol/L,15nmol/L,7.5nmol/L)。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3. 各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準.
計算:
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,
在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD
值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋
倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標
準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值     
代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋
倍數,即為樣品的實際濃度。

試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990以上。
2.批內與批見應分別小于9%和11%

檢測范圍:
1nmol/L -90nmol/L

保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月

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